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微生物法測(cè)定食品水溶性維生素及小分子

更新時(shí)間:2018-05-22  |  點(diǎn)擊率:1810

如題,采用微生物法測(cè)定有兩個(gè)前提條件。一是使用的菌株需要對(duì)待測(cè)維生素足夠敏感,并能快速生長(zhǎng),其生長(zhǎng)繁殖速度與待測(cè)維生素濃度存在一定的對(duì)應(yīng)關(guān)系;二是該維生素為水溶性。國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)中提到多種維生素測(cè)定的方法為微生物法?,F(xiàn)總結(jié)如下:

 

1、葉酸,微生物法檢測(cè),鼠李糖乳桿菌ATCC7469

2、維生素B12,嬰幼兒食品和乳品檢測(cè),微生物法,萊士曼乳桿菌ATCC 7830

3、維生素B6,微生物法檢測(cè),用卡爾斯伯酵母菌ATCC 9080

4、泛酸,嬰幼兒食品和乳品檢測(cè),微生物法,植物乳桿菌ATCC 8014

5、煙酸,微生物法檢測(cè),植物乳桿菌ATCC 8014

6、生物素,微生物法檢測(cè),植物乳桿菌ATCC 8014

7、肌醇,微生物法檢測(cè),葡萄汁酵母菌ATCC9080

 

維生素B2在原來(lái)的國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)GB5009.85-2003中也推薦微生物法,但該標(biāo)準(zhǔn)2017年廢止,現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)不包含微生物法。

 

圖.HiMedia生產(chǎn)的維生素B12測(cè)定用培養(yǎng)基

 

水溶性維生素的提取方法包括用緩沖液或硫酸溶液進(jìn)行水解、調(diào)節(jié)pH值沉淀蛋白或者使用合適的蛋白沉淀劑、用合適的酶進(jìn)行酶解等。

 

對(duì)于煙酸,數(shù)據(jù)表明大多數(shù)食品用水直接提取即可,但是谷類(lèi)必須用酸或堿才能提取*。

 

對(duì)于泛酸,由于它對(duì)酸、堿的不穩(wěn)定性,樣品提取都用水溶解,在中性條件下直接提取或高壓處理。有人發(fā)現(xiàn)用淀粉酶處理酵母和動(dòng)物組織后,得到的泛酸含量會(huì)增加。

 

對(duì)于生物素,有研究表明3mol/LH2SO4水解處理時(shí),植物組織中的生物素不穩(wěn)定,受到一定的破壞;而動(dòng)物組織中結(jié)合態(tài)的生物素能更多地游離出來(lái),所以推薦用1mol/L H2SO4于121℃水解植物性來(lái)源的樣品2h、3mol/L于H2SO4121℃水解動(dòng)物性來(lái)源的樣品2h。

 

對(duì)于維生素B6,有人發(fā)現(xiàn)植物性樣品用0.022mol/L鹽酸水解5h能得到zui大值,而米糠需要用1mol/L的鹽酸才能水解充分。

 

對(duì)于葉酸的測(cè)定,研究表明,蛋白酶、淀粉酶和葉酸軛合酶聯(lián)合提取,能使12種食品的葉酸水平平均提高19%。但對(duì)于不同食品應(yīng)區(qū)分對(duì)待。如它對(duì)谷類(lèi)產(chǎn)品有效,但對(duì)蔬菜則不然。蛋白酶能使菠菜釋放的葉酸,而淀粉酶無(wú)效。總之,適宜的前處理方法有助于獲得zui大檢出結(jié)果。

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