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細胞株的污染鑒定、預防和處理問題

更新時間:2022-09-29  |  點擊率:783

普通微生物污染:培養(yǎng)基渾濁,高倍鏡觀察有微生物污染;按規(guī)定棄用并全面嚴格滅菌。

支原體污染:顯微鏡很難直接觀察,細胞通常表現為細胞生長緩慢,有細胞漂浮等等,可通過MB Venor®Gem qEP試劑盒,進行支原體檢測。如發(fā)現支原體污染,應按規(guī)定棄用,實驗室要及時全面消毒滅菌,防止蔓延,推薦使用MB Mycoplasma-off™對細胞培養(yǎng)環(huán)境進行清理 ,使用Water Shield™對水槽進行清潔、預防處理。如果細胞株珍貴,可用MB相關支原體祛除試劑Mynox®、Mynox® Gold、Zell Shield®對細胞進行處理。

如何挑選胎牛血清?

細胞要養(yǎng)好,需要選擇品質優(yōu)異的血清,如Ausbian®進口特級胎牛血清,它適合各種細胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細胞,如:干細胞、肝細胞,神經細胞,原代培養(yǎng)、細胞融合、轉染細胞等。

WHO公布的《用動物細胞體外培養(yǎng)生產生物制品規(guī)程》中的要求:

1、牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家,并應具備適當的監(jiān)測系統(tǒng)。

2、有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。

3、證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的抑制物。

4、血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。

5、無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。

6、對細胞有良好的支持繁殖作用。

我國對牛血清的質量中提出比較嚴格的標準要求:

包括蛋白質含量,細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素,支持細胞增殖檢查。一款來自澳洲的Ausbian®胎牛血清在市場上頗受歡迎。它具有精選內毒素極低、產量充足的血清批次,滿足干細胞、基因敲除、原代培養(yǎng)、細胞典藏、長期傳代等各類細胞的培養(yǎng)要求;澳洲血源,完整的檢測報告及滅病毒服務,為各類臨床相關項目的申報提供完整支持等特點。


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